Poshangfeng Kangdusu

Tetanus Antitoxin

本品系由破伤风类毒素免疫马所得的血浆，经胃酶消化后纯化制成的液体抗毒素球蛋白制剂。用于预防和治疗破伤风梭菌引起的感染。

生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2.1  抗原与佐剂

　　应符合“人用马免疫血清制品总论”的规定。

　　2.2  免疫动物及血浆

　　2.2.1  免疫动物

　　免疫用马匹必须符合“人用马免疫血清制品总论”的规定。

　　2.2.2  采血与分离血浆

　　按“人用马免疫血清制品总论”的规定进行。用动物法或其他适宜的方法测定免疫血清效价，不低于1200IU/ml时，即可采血。分离之血浆可加入适宜抑菌剂，并应做无菌检查（通则1101）。

　　2.3  胃酶

　　用0.85%～0.90%氯化钠溶液将胃酶配制成lmg/ml溶液，进行类A血型物质含量测定（通则3415），应不高于1.0µg/ml。

　　2.4  原液

　　2.4.1  原料血浆

　　原料血浆的破伤风抗毒素效价应不低于1000IU/ml（通则3508）。血浆在保存期间，如发现有明显的溶血、染菌及其他异常现象，不得用于制备。

　　2.4.2  制备

　　2.4.2.1  消化

　　将免疫血浆稀释后，加入适量胃酶，如果必要还可加入适量甲苯，调整适宜pH值后，在适宜温度下消化一定时间。

　　2.4.2.2  纯化

　　采用加温、硫酸铵盐析、明矾吸附等步骤进行纯化。

　　2.4.2.3  浓缩、澄清及除菌过滤

　　浓缩可采用超滤或硫酸铵沉淀法进行。可加入适量硫柳汞或间甲酚作为抑菌剂，然后澄清、除菌过滤。

　　纯化后的抗毒素原液应置2～8℃避光保存至少1个月作为稳定期。

　　2.4.3  原液检定

　　按3.1项进行。

　　2.5  半成品

　　2.5.1  配制

　　将检定合格的原液，按成品规格以灭菌注射用水稀释，调整效价、蛋白质浓度、pH值及氯化钠含量，除菌过滤。

　　2.5.2  半成品检定

　　按3.2项进行。

　　2.6  成品

　　2.6.1  分批

　　应符合“生物制品分装及贮运管理”规定。

　　2.6.2  分装

　　应符合“生物制品分装及贮运管理”及通则0102有关规定。

　　2.6.3  规格

　　每瓶0.75ml，含破伤风抗毒素1500IU（预防用）或每瓶2.5ml，含破伤风抗毒素10 000IU（治疗用）。

　　2.6.4  包装

　　应符合“生物制品分装及贮运管理”及通则0102有关规定。

3.1  原液检定

　　3.1.1  抗体效价

　　依法测定（通则3508）。

　　3.1.2  无菌检查

　　依法检查（通则1101），应符合规定。

　　3.1.3  热原检查

　　依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每lkg注射3.0ml。

　　3.2  半成品检定

　　无菌检查

　　依法检查（通则1101），应符合规定。

　　3.3  成品检定

　　3.3.1  鉴别试验

　　每批成品至少抽取1瓶做以下鉴别试验。

　　3.3.1.1  动物中和试验或特异沉淀反应

　　按通则3508进行，供试品应能中和破伤风毒素;或采用免疫双扩散法（通则3403），供试品应与破伤风类毒素产生特异沉淀线。

　　3.3.1.2  免疫双扩散或酶联免疫吸附试验

　　采用免疫双扩散法（通则3403）进行，供试品仅与抗马的血清产生沉淀线;或采用酶联免疫吸附法（通则3418），供试品应与马IgG抗体反应呈阳性。

　　3.3.2  物理检查

　　3.3.2.1  外观

　　应为无色或淡黄色的澄明液体，无异物，久置有微量可摇散的沉淀。

　　3.3.2.2  渗透压摩尔浓度

　　应符合批准的要求（通则0632）。

　　3.3.2.3  装量

　　依法检查（通则0102），应不低于标示量。

　　3.3.3  化学检定

　　3.3.3.1  pH值

　　应为6.0～7.0（通则0631）。

　　3.3.3.2  蛋白质含量

　　应不高于100g/L（通则0731第一法）。

　　3.3.3.3  氯化钠含量

　　应为7.5～9.5g/L（通则3107）。

　　3.3.3.4  硫酸铵含量

　　应不高于1.0g/L（通则3104）。

　　3.3.3.5  抑菌剂含量

　　如加硫柳汞，含量应不高于0.1g/L（通则3115）;如加间甲酚，含量应不高于2.5g/L（通则3114）。

　　3.3.3.6  甲苯残留量

　　生产工艺中如添加甲苯，需检测甲苯残留量，应不高于0.089%（通则0861）。

　　3.3.3.7  分子大小分布

　　完整IgG与聚合物的含量之和应不高于5%（通则3128）。

　　3.3.4  纯度

　　3.3.4.1  白蛋白检查

　　将供试品稀释至2%的蛋白质浓度，进行琼脂糖凝胶电泳分析（通则0541第三法），应不含或仅含痕量白蛋白迁移率的蛋白质成分。

　　3.3.4.2  F（ab'）₂和IgG含量

　　釆用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（通则0541第五法）测定，上样量约25μg，F（ab'）2含量预防用的应不低于60%，治疗用的应不低于70%;IgG含量应不高于5%。

　　3.3.5  抗体效价

　　预防用的效价应不低于2000lU/ml，比活性为每1g蛋白质应不低于45  000IU;治疗用的效价应不低于4000lU/ml，比活性为每1g蛋白质应不低于55  000IU（通则 3508）。每瓶破伤风抗毒素装量应不低于标示量。

　　3.3.6  无菌检查

　　依法检查（通则1101），应符合规定。

　　3.3.7  热原检查

　　依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。

　　3.3.8  异常毒性检查

　　依法检查（通则1141），应符合规定。

于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为36个月。

应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。

中华人民共和国药典：2020年版.三部/国家药典委员会编. —北京：中国医药科技出版社，2020.5 ISBN 978-7-5214-1575-9